ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ
ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ
Искусственное осеменение – это процесс введения в половые пути самки определенной дозы спермы с помощью специальных инструментов.
Преимущества искусственного осеменения
А) значительно сокращается объем и количество спермы для оплодотворения одной самки.
Б) сперму ценных производителей можно долгосрочно сохранять и использовать в течение нескольких десятилетий.
В) возможно координировать племенное дело во всех регионах
Г) за счет отбора и подбора родительских пар направленно получать желаемые изменения и признаки.
Эффективность искусственного осеменения проявляется лишь в сочетании с полноценным кормлением, правильным содержанием и эксплуатацией.
Физиологические основы искусственного осеменения
Техника искусственного осеменения самок животных разных видов основаны на особенностях строения половых органов. Кроме этого, особое значение приобретает скорость перемещения спермы, зависящая от состояния самки. Чем ближе момент овуляции, чем выше нервный и гормональный тонус половых путей, тем быстрее спермии перемещаются.
Фолликулярная жидкость при овуляции поступает сначала в яйцепровод, затем в матку и приводит спермии в активное состояние. В половых органах коров, овец и крольчих спермии сохраняют жизнеспособность в среднем 36-48 час, свиней – 24-48 час, у кобыл до 90 час, у собак до 6-7 суток. Спермии птиц в отличие от спермиев животных сохраняются до 35 дней и более.
Время осеменения самок
После овуляции яйцеклетки в яйцепроводах сохраняют способность и оплодотворяющую способность к оплодотворению всего лишь 2-6 час, у собак 2-3 дня. У коров и телок фолликулы (в отличие от других) овулируют через 10-15 час после окончания охоты, поэтому их осеменяют в середине и в конце охоты. У кобыл, овец, коз, свиней и собак фолликулы овулируют во вторую половину охоты спонтанно. Характерная особенность крольчих провоцированная овуляция: для разрыва фолликулов необходимо спаривание. У домашних птиц яйца образуются спонтанно вовремя всего периода яйцекладки (сезон).
Способы искусственного осеменения самок. При искусственном осеменении введение спермы имитирует в основном у всех самок по маточному типу. При осеменении коров (телок), овец, коз и крольчих сперму вводят в шейку матки (цервикальный метод), где наиболее благоприятные условия выживаемости спермиев. При осеменении кобыл, свиноматок и собак сперму вводят непосредственно в матку (тело матки).
Ветеринарно-санитарные правила при искусственном осеменении
Для того чтобы предотвратить опасность распространения заболеваний, необходимо строго соблюдать следующие правила:
А) техники по искусственному осеменению животных в чистых халатах, колпаках и косынках, а в неблагополучных по инфекционным болезням хозяйствах в фартуках и резиновых сапогах
Б) инструменты для искусственного осеменения, приборы, посуда и оборудование должно быть стерильным
В) шприцы – катетеры стерилизуют в разобранном виде: кипятят 15-20 минут при закрытом стерилизаторе.
Г) влагалищное зеркало можно дезинфицировать с помощью 96% этанола с последующим обмыванием стерильным раствором 1% NaCl.
Д) перед искусственным осеменением самок (коров, телок, кобыл, овец, коз, свиноматок) фиксируют в специальных станках (или стойлах). Наружные половые органы обмывают чистой водой из кружки Эсмарха, орошают раствором фурациллина (1:5000), фуразолидона (1:1000), насухо вытирают, раскрывают половые губы самок и вводят стерильные инструменты. Влагалищное зеркало обязательно предварительно увлажняют теплым стерильным 1% раствором хлорида натрия.
Искусственное осеменение коров
Коров и телок осеменяют только при наличии у них половой охоты дважды: первый раз сразу после выявления охоты и второй раз – через 10-12 часов (если охота продолжается). Допускается и однократное осеменение, но только при ректальном контроле созревания фолликулов в яичниках или выявления охоты быком-пробником. Иногда практикуют двукратное осеменение в течение одной охоты с интервалом 10-15 мин.
В настоящее время применяют 4 способа искусственного осеменения коров и телок: влагалищный – сперму вводят во влагалище или на шейку матки, визоцервикальный – с использованием влагалищного зеркала, ректоцервикальный и маноцервикальный.
При осеменении коров и телок свежеполученной спермой работают в лаборатории или манеже при t 18-20ºС. Сперму набирают в теплый шприц-катетер или осеменительную полистироловую пипетку, Катетер опускают во флакон со спермой и медленно набирают ее в шприц. Затем, повернув шприц катетером вверх, движением поршня вниз собирают всю сперму из канала катетера в цилиндр шприца. Не изменяя положения шприца, поршень осторожно двигают вверх, вытесняя из цилиндра пузырьки воздуха до появления на конце катетера капли спермы, которую наносят на предметное стекло, чтобы вторично оценить активность спермиев. В том случае, если качество спермы не снизилось, приступают к осеменению.
Если коров осеменяют спермой, охлажденной до 0-4 ºС, то ее набирают в предварительно нагретый шприц-катетер, для чего последний несколько раз промывают стерильным 1% раствором NaCl или 1% раствором бикарбоната натрия t 42-45ºС. В этом случае t шприца = 35-40ºС. А набранной в него спермы – 30-35ºС
Гранулированную сперму, находящуюся в ампулах или флаконах, после оттаивания сразу помещают в гнезда штатива, изготовленного из поролона. Гранулы спермы объемом 0,5 мл размораживают в стерильном фоаконе. Стерильным карнцангом из сосуда Дьюара достают две гранулы (доза) и помещают в теплую воду в термосе при t 40-42ºС, вращая флакон до полного оттаивания двух гранул. При объеме грану 0,5 мл время оттаивания двух гранул составляет 1,5-2 мин. Нельзя в один помещать несколько доз, т.е.4, 6, и более гранул, т.к нарушается режим размораживания. Снижается и оплодотворяющая спосбность спермы.
Сперму, замороженную в облицованных гранулах оттаивают в термостате при t воды 38-40ºС в течение 8-10 сек.
После оттаивания спермы облицовку насухо протирают стерильной салфеткой и проверяют на герметичность путем легкого надавливания. Убедившись, что герметичность облицованной гранулы не нарушена, последнюю помещают в корпус одноразового инструмента для маноцервикального способа введения, затем толкателем продвигают ее к переднему краю корпуса до упора. Через выходное отверстие корпуса инструмента стерильной иглой прокалывают оболочку гранулы и вводят сперму в половые пути коровы.
Если используются гранулы концентрированной спермы объемом 0,1-0,2 мл, то ее размораживают в стерильном 2,9% растворе цитрата натрия в ампулах объемом 0,8-1 мл, при этом помещая в теплую воду (40-42ºС) на 5-8 сек. В одной ампуле оттаивают только одну гранулу. Ампулу с размороженной спермой сразу вынимают из сосуда с водой и ставят на стол в гнезда штатива при комнатной температуре 18-20ºС или помещают в термос.
Когда сперма, заморожена в соломинках или пайетах в дозе 0,2-0,25 мл, ее оттаивают в термосе или термостате при t воды = 38ºС в течение 9-10 сек. Соломинку вынимают и очищают от воды, осторожно заворачивают в бумажную салфетку и промакивают.
Осеменение визоцервикальным способом
Для этого способа используются 4 пронумерованные стеклянные баночки (№1,2,3,4) на 100 мл с притертыми крышками. В банки №1,3,4 наливают стерильный 15 раствор натрия хлорида (можно 2,8% раствор цитрата натрия), в банку №2 – 70% этиловый спирт; раствор в банках №3 и 4 должен быть теплым (38-40ºС), чтобы шприц-катетер нагревать перед наполнением его спермой. Шприц отмывают раствором по 3-4 раза из банки №1 и после обеззараживания 70% этиловым спиртом из банки №2 моют раствором из банок №3 и 4 (удаляя остатки спирта)
Набрав сперму, шприц держат вертикально, катетером вверх. Подготовленное влагалищное зеркало, увлажненное теплым (38-40ºС) стерильным 1% раствором хлорида натрия, вводят во влагалище самки (предварительно наружные половые органы обрабатывают теплой водой, раствором фуразолидона, высушивают салфеткой или ватой. Вводят влагалищное зеркало, поворачивают ручками вниз, осторожно раскрывают бранши и, отыскав шейку матки вводят в нее канал шприц-катетер или осеменительную пипетку на глубину 4-6 см.
Осеменение ректоцервикальным способом
Перед осеменением инструменты готовят следующим образом:
- уголок пакета с одноразовыми стерильными пипетками протирают тампоном, смоченным 96% спиртом и прорывают пипеткой;
- выдвинув пипетку на 1/3 длины ее соединяют со шприцем и извлекают из пакета.
Если используется сперма замороженная в пайетах, то используется специальный инструмент состоящий из чехла, металлического цилиндра с поршнем, длиной45 сми фиксационной пружины. Пакет с защитными чехлами также обрабатывают тампоном смоченным этиловым спиртом, отрезают уголок пакета, на предварительно подготовленный шприц со вставленной пайетой надевают защитный чехол и фиксируют пружиной (перед этим отрезают кончик пайеты, направленный наружу).
Подготовленные для осеменения инструменты кладут на специальную подставку. Каплю спермы выдавливают на предметное стекло и обязательно проверяют под микроскопом на активность.
Перед осеменением коровы (телки) надевают одноразовую перчатку на руку, увлажняют ее теплой водой (лучше мыльной) и раскрывают наружные половые органы коровы, а другой рукой вводят пипетку или осеменительный инструмент с пайетой под углом 25-35º во влагалище до шейки матки. Затем руку в полиэтиленовой перчатке вводят в прямую кишку и находят шейку матки, фиксируя ее между указательным и средним пальцами. Большим пальцем или мизинцем направляют инструмент в канал шейки матки на глубину 6-8 см, медленно надавливают на поршень шприца или выталкиватель спермы из пайеты.
Осеменение маноцервикальным способом
Изначально, как это принято при любом способе, проводится тщательный туалет наружных половых органов коровы. Далее достают ампулы со спермой из термоса или оттаивают их, если она хранилась в жидком азоте, протирают спиртовым тампоном, стерильными ножницами срезают колпачок ампулы, выдавливают каплю спермы на предметное стекло, чтобы оценить активность. Затем соединяют ампулу с катетером. Не вынимая из полиэтиленового пакета.
Надевают на руку перчатку, увлажняют теплым 1% раствором натрия хлорида, вводят руку во влагалище коровы, нащупав шейку матки определяют ее состояние. Затем руку отводят до преддверия влагалища, другой рукой подают подготовленную ампулу с катетером в руку, находящуюся во влагалище, вставляют катетер в канал шейки матки на глубину 4-6 см. выдавливают сперму большим и указательным пальцами от донышка ампулы по направлению к катетеру. Не разжимая ампулы, осторожно вынимают катетер из канала и делают легкий массаж шейки матки
ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ ОВЕЦ И КОЗ
Овец и коз осеменяют визоцервикальным способом разбавленной или неразбавленной спермой на пунктах искусственного осеменения, как свежеполученной (сохраненной при температуре 2-4ºС в течение 2-х суток с активностью не ниже 8 баллов), так и замороженной при температуре -196ºС (после оттаивания активность спермиев должна быть не ниже 4 баллов).
Козу или овцу заводят в станок и обрабатывают наружные половые органы салфеткой, смоченной раствором фурациллина 1:500. Перед осеменением при помощи стерильного теплого влагалищного зеркала осматривают влагалище самки, чтобы проверить, нет ли у нее признаков заболевания – сыпи, крови, гноя. Приоткрывают бранши у шейки матки. Затем катетер шприца вводят в канал шейки матки на глубину 1-2 сми надавливают на поршень большим пальцем руки, чтобы сперма не вытекала во влагалище перед нажатием на поршень зеркало слегка оттягивают назад. Перед осеменением следующей овцы (козы) катетер шприца протирают тампоном, пропитанным 96%-ным спиртом так, чтобы спирт не попал в канюлю.
Влагалищное зеркало после каждой овцы моют теплым 2-3% раствором бикарбоната натрия, насухо вытирают и обеззараживают (фламбируют). Когда вся сперма израсходована, перед наполнением микрошприца спермой от другого барана (козла) шприц промывают 1%-ным раствором хлорида натрия (баночка №1), затем 70%-ным спиртом (баночка №2) и отмывают спирт (из баночек №3 и №4).
После работы шприцы-катетеры моют теплой водой и стерилизуют кипячением (можно в шприце оставлять 70% спирт до следующего осеменения).
Овец (коз) осеменяют двукратно в одну охоту. Половую охоту выявляют бараном-пробником 2 раза в сутки – утром и вечером. Овец, у которых охота продолжается более суток, нужно осеменять двукратно: первый раз сразу после выборки и второй раз через сутки (после каждого осеменения овец метят легко смывающейся краской на крупе). Овец и коз, у которых трудно обнаружить шейку матки, можно осеменять влагалищным способом (парацервикально) Шприц-катетер с укороченным концом глубоко вводят во влагалище самки и выдавливают неразбавленную сперму в дозе 0,1 мл, разбавленную – в дозе 0,2 мл.
Из осемененных овец формируют новую отару и с 12 дня после осеменения бараном-пробником выбирают овец, пришедших в повторную охоту.
ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ СВИНЕЙ
В отличие от искусственного осеменения крупного рогатого, где в основном используется привозная размороженная сперма, в свиноводстве производителей очень часто содержат в хозяйствах. Поэтому для организации осеменения сначала от хряка получают сперму. Как правило режим взятия один раз в 5-7 дней.
В том случае, если сперму собираются использовать в течение продолжительного времени, ее необходимо замораживать. Поэтому после взятия ее отфильтровывают от секрета куперовых желез. Фильтрат выдерживают в темноте при температуре 18-20ºС в течение 60 мин. Для замораживания используют эякулят с активностью спермиев не менее 7 баллов и концентрацией не менее 150 млн/мл.
После часовой выдержки при t 18-20 ºС сперму подогревают до 30 ºС, разбавляют в отношении 1:1 подогретой до этой же температуры средой. Затем сперму выдерживают дополнительно при t 18-20 ºС в течение 4 часов, после чего помещают в холодильник (10 ºС) и спустя 30 мин. Колбу со спермой переносят на 10-15 мин в тающий лед с водой (0 ºС).
Если сперму замораживают в гранулах на блоке сухого льда, диаметр лунок1 см, объем гранул 0,5 мл спустя 5 мин гранулы переносятся в жидкий азот для хранения.
Гранулы размораживают в специальном устройстве с водой подогретой до t 42-43 ºС. С помощью устройства отделяют жидкую фазу спермы от твердой в момент ее образования.
Активность спермиев составляет около 4-5 баллов. Свиноматок осеменяют дважды в одну охоту дозой 100 мл, содержащей 3-5 млрд. подвижных спермиев.
Сперму хряков при осеменении свиней вводят непосредственно в матку. Во время использования сперма должна быть t 30-35 ºС, т.к. холодная сперма вызывает сокращение матки и выбрасывается во влагалище свиньи и наружу. В наше время широко используются полиэтиленовые приборы ПОС-5.
Свиней осеменяют на пунктах в индивидуальных станках-клетках или непосредственно в станках, где они содержатся. Наружные половые органы самки обрабатывают раствором фурациллина 1:5000. катетер во влагалище свиньи вводят без влагалищного зеркала до упора в шейку матки на глубину 25-30 сми затем непосредственно в шейку матки (которая периодически сокращается), поэтому вливать сперму в матку надо в течение 3-4 мин. Доза спермы – 1 мл на1 кгживой массы животного, но не более 150 мл (3-5 млрд. активных спермиев). Фракционный способ искусственного осеменения свиней заключается во введении в матку сначала малоразбавленной (1:1) или неразбавленной спермы в объеме 40-50 мл (2-3 млрд. подвижных спермиев) , а затем разбавителя (глюкозо-солевого) – 70-100 мл. Для этого способа применяют специальный зонд УЗК-5, состоящий из металлического катетера с головкой на конце, который соединяют с флаконами для спермы и разбавителя. Флаконы соединены резиновыми трубками с шарами Ричардсона. Флаконы на 100-250 мл помещают в деревянные ящики с подогревом. После введения зонда в матку открываю флакон со спермой и при помощи шаров Ричардсона воздухом вытесняют необходимую дозу спермы в канал шейки матки; флакон со спермой закрывают, открывают флакон с разбавителем и вводят определенную дозу.
Половую охоту у свиноматок выявляют утром и вечером с помощью хряка-пробника в специально выделенных для этого станках или двориках (рефлекс неподвижности). Свиноматок в состоянии охоты осеменяют сразу же и затем повторно через 20-24 часа.
ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ КОБЫЛ
Подготовка к осеменению кобылы всегда сопровождается дополнительными мероприятиями по предупреждению травматизма. Поэтому для начала кобылу заводят в станок или удерживают за повод, кроме того, во время введения спермы кобыле поднимают переднюю конечность, чтобы она не могла ударить задней. Предварительно корень хвоста забинтовывают. Конюх отводит хвост кобылы в сторону и обмывает наружные половые органы из кружки Эсмарха раствором фурациллина 1:5000. осеменяют кобыл двумя способами: визоцервикальным и маноцервикальным. Сперму вводят непосредственно в матку (на глубину 10-20 см) применяется резиновый, эбонитовый или полистероловый катетер.
Искусственное осеменение кобыл может быть проведено двумя способами.
Для маноцервикального способа используют резиновый и полистероловый катетеры. Подготовленную руку ветспециалист вводит во влагалище кобылы, конец катетера, продвигает через шейку в тело матки; помощник поднимает шприц или ампулу и вводит сперму.
Для визоцервикального способа осеменения используют как эбонитовый, так и полистероловый катетер конструкции ВНИИ коневодства. Катетер представляет собой трубку длиной50 сми толщиной0,6 см, один конец которой расширен в виде головки. Катетер соединяют со шприцем или ампулой резиновой муфтой с хомутиком. Катетер используют одновременно с влагалищным зеркалом, которое стерилизуют и увлажняют 0,9% раствором NaСl.
Осеменяют кобыл свежеполученной или сохраненной при t 2-4ºС в течение 3 суток или размороженной. При оттаивании спермы, замороженной в алюминиевых пакетах, их быстро переносят пинцетом из жидкого азота на 1 минуту в водяную баню t 40ºС. Доза свежеполученной спермы -25-30 мл. В дозе должно быть не менее 150-300 млн спермиев с ППД. Активность свежеполученной спермы не ниже 6 баллов, оттаянной – 2 балла.
Сперму вводят только подогретой до t 30-35ºС. Осемененных кобыл через 8-9 дней проверяют жеребцом-пробником на наличие половой охоты. Через 35-40 дней после осеменения кобыл проверяют на жеребость ректальным методом.
ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ ПТИЦ
Осеменение птицы организуют во второй половине дня (после яйцекладки): кур – 1 раз в 5 дней, гусынь – 1 раз в день и индеек в начале сезона 2-3 раза с интервалом 1-2 дня, затем 10-12 дней.
Для эффективности процесса осеменения работу бригад, делят на 2 группы. Первая группа (2 человека) получает сперму от петухов, вторая (2-3 человека) осеменяет кур. За 1 час можно осеменить 120-150 кур. Помощник держит курицу левой рукой, а правой надавливает ей слегка на живот в области между лонными костями и грудной клеткой, где расположен яйцепровод. При этом клоака птицы слегка вытягивается. Левой рукой ветспециалист слегка растягивает клоаку ватным тампоном, смоченным раствором фурациллина 1:5000, пока не покажется отверстие яйцепровода, расположенное несколько слева. Правой рукой вводит в яйцепровод катетер на глубину 4-5 сми выдавливает дозу спермы.
Доза составляет 0,02, 0,03 и 0,05 мл и содержание спермиев не менее 10 -15 млн, активностью 7 баллов.
ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ КРОЛЬЧИХ
Основная особенность искусственного осеменения крольчих состоит в том, что овуляция у них происходит только в результате раздражения рецепторов влагалища. Поэтому крольчиху сначала спаривают с вазэктомированным самцом. Затем фиксируют на специальном станке спиной вниз. Ватным тампоном, увлажненным раствором фурациллина 1:5000 обрабатывают наружные половые органы самки. Набирают в шприц-катетер (можно использовать укороченный для осеменения овец) свежеразбавленную сперму (0,3 мл) или сохраненную в течение 5-6 часов при t 0ºС (0,4 мл) с оценкой не ниже 6 баллов и содержанием 5-10 млн спермиев в дозе. Можно использовать сперму, размороженную в термостате при t 38ºС, в дозе 1 мл с активностью 3 балла, содержащую не менее 4,5 млн подвижных спермиев.
Во время осеменения пальцами левой руки слегка раздвигают половую щель самки, а правой рукой вводят шприц-катетр, направляя сначала вниз, а затем во влагалище, за лонным сращением его поворачивают параллельно оси позвоночника самки. При введении шприца нельзя допускать резких движений. Иногда шприц-катетер трудно проходит во влагалище в результате спазма. В этом случае надо сделать паузу, после чего катетер вводят на 12-14 сми впрыскивают сперму у шеек маток (двойной тип матки).